Bei den Analysen, die ich früher an dieser Stelle besprach, bestand das Verfahren darin, den Wirkstoff an sich quantitativ zu erfassen, ungeachtet dessen, was sich sonst im Carrier befand. Die Methode stützte sich darauf ab, daß in der Lösung wirklich der Wirkstoff enthalten war, an dem man interessiert war.
Vorteil dieser Methode: schnell durchzuführen, rel. preiswert.
Bei der neulich angewendeten Methode wurde die Probe zuerst flüssichromatographisch in die Gemischbestandteile zerlegt (mittels HPLC an Umkehrphase) und die einzelnen Bestandteile wie bei der obigen Methode ermittelt. Die Identität des gesuchten Wirkstoffes kann durch paralleles Einspritzen einer Referenzsubstanz nahezu sicher bestimmt werden, was in der ersten Methode nicht möglich ist, da die Detektion für nahezu alle Steroide gleich läuft.
Trennmethode:
HPLC an Umkehrphase, Säule: ZORBAX ODS, 4,6mmx25cm.
Isokratische Trennung an Acetonitril/Wasser 85%:15% (beide in HPLC-Reinheit).
Detektion: UV-Spektrometer UVIKON 350 mit Durchflußzelle bei 244 bzw. 344 nm.
Referenzsubstanzen: Thinker Chemicals (Hangzhou, China) und Changzhou Yabang Corp. Ltd., (Changzhou, Jiangsu, China).
Mittels gesicherter Referenzsubstanzen wurden Stammlösungen in Acetonitril hergestellt.
Die Fläche unter der Signal ist direkt proportional der Menge und der Art des Stoffes (daher die Referenzen).
Um eine etwas aufwendige Integration der Signalfläche zu umgehen (könnte heute von der Maschine erledigt werden), wurde die Schreibergeschwindigkeit so verkleinert, daß anstatt der Signalfläche die Signalhöhe zur Auswertung eingesetzt werden kann.
Stammlösungen: die eingewogenen Mengen (Waage: Mettler AE160) wurde mit Acetonitril im Meßkolben auf 50 ml aufgefüllt.
Testosteronpropionat TeProp(Hänseler): 0,2 ml (mit 1 ml-Spritze) einer exakten Lösung, die 100mg/ml enthielt, wurden mit Acetonitril auf 50 ml gebracht. Diese Lösung wurde anschl. zehnfach verdünnt.
Trenbolonenanthat (Changzhou Yabang)
1) 5,5 mg 2) 6,7 mg 3) 7,2 mg
Trenbolonacetat (Thinker Chemicals)
4) 6,0 mg 5) 7,6 mg 6) 4,5 mg
Analyseproben:
TeProp (user9, Homebrew mit Benzylbenzoat): 0,2 ml der öligen Lösung wurden mit Acetonitril auf 50 ml gebracht.
Diese Lösung wurde zehnfach verdünnt.
TT (user10, Gemisch dreier Trenbolonester)): 0,2 ml der öligen Lösung wurden mit Acetonitril auf 50 ml gebracht.
FB (user22, Trenbolonacetat): 0,2 ml der öligen Lösung wurden mit Acetonitril auf 50 ml gebracht.
Abbildungen:
1. Testopropionat (Hänseler), Retentionszeit bei 1,5 ml/min und 1cm/min: ca. 5 min,
2. Testopropionat neben angeblichem Testopropionat (mit Benzylbenzoat), 1,5 ml/min, 1 cm/min,
3. Trenbolonacetat, Retentionszeit bei 1,5 ml/min und 1cm/min: ca. 3,3 min,
4. FB bei 1,5 ml/min und 1 cm/min,
5. Trenbolonenanthat, Retentionszeit bei 1,5 ml/min und 1 cm/min: ca. 14 min,
6. TT bei 2 ml/min und 1 cm/min,
7., 8. mittels der eingewogenen Wirkstoffmengen bestimmte Eichgeraden.
Verdankungen:
Den Herren Proff. P. Rüedi und M. D’Agostinis, Organisch-chemisches Institut der Universität Zürich-Irchel, sei für die Benützung ihrer Laboratorien, sowie für die Betreuung der Analyse ganz herzlich gedankt. Die Analysen wurden in der Zeit vom 25.-27.92006 durchgeführt.
*Weil mir zugetragen wurde, daß das Prinzip der Chromatographie nicht klar sei, erkläre ich diese grundlegende Labormethode in einem eigenen Thread.
Vorteil dieser Methode: schnell durchzuführen, rel. preiswert.
Bei der neulich angewendeten Methode wurde die Probe zuerst flüssichromatographisch in die Gemischbestandteile zerlegt (mittels HPLC an Umkehrphase) und die einzelnen Bestandteile wie bei der obigen Methode ermittelt. Die Identität des gesuchten Wirkstoffes kann durch paralleles Einspritzen einer Referenzsubstanz nahezu sicher bestimmt werden, was in der ersten Methode nicht möglich ist, da die Detektion für nahezu alle Steroide gleich läuft.
Trennmethode:
HPLC an Umkehrphase, Säule: ZORBAX ODS, 4,6mmx25cm.
Isokratische Trennung an Acetonitril/Wasser 85%:15% (beide in HPLC-Reinheit).
Detektion: UV-Spektrometer UVIKON 350 mit Durchflußzelle bei 244 bzw. 344 nm.
Referenzsubstanzen: Thinker Chemicals (Hangzhou, China) und Changzhou Yabang Corp. Ltd., (Changzhou, Jiangsu, China).
Mittels gesicherter Referenzsubstanzen wurden Stammlösungen in Acetonitril hergestellt.
Die Fläche unter der Signal ist direkt proportional der Menge und der Art des Stoffes (daher die Referenzen).
Um eine etwas aufwendige Integration der Signalfläche zu umgehen (könnte heute von der Maschine erledigt werden), wurde die Schreibergeschwindigkeit so verkleinert, daß anstatt der Signalfläche die Signalhöhe zur Auswertung eingesetzt werden kann.
Stammlösungen: die eingewogenen Mengen (Waage: Mettler AE160) wurde mit Acetonitril im Meßkolben auf 50 ml aufgefüllt.
Testosteronpropionat TeProp(Hänseler): 0,2 ml (mit 1 ml-Spritze) einer exakten Lösung, die 100mg/ml enthielt, wurden mit Acetonitril auf 50 ml gebracht. Diese Lösung wurde anschl. zehnfach verdünnt.
Trenbolonenanthat (Changzhou Yabang)
1) 5,5 mg 2) 6,7 mg 3) 7,2 mg
Trenbolonacetat (Thinker Chemicals)
4) 6,0 mg 5) 7,6 mg 6) 4,5 mg
Analyseproben:
TeProp (user9, Homebrew mit Benzylbenzoat): 0,2 ml der öligen Lösung wurden mit Acetonitril auf 50 ml gebracht.
Diese Lösung wurde zehnfach verdünnt.
TT (user10, Gemisch dreier Trenbolonester)): 0,2 ml der öligen Lösung wurden mit Acetonitril auf 50 ml gebracht.
FB (user22, Trenbolonacetat): 0,2 ml der öligen Lösung wurden mit Acetonitril auf 50 ml gebracht.
Abbildungen:
1. Testopropionat (Hänseler), Retentionszeit bei 1,5 ml/min und 1cm/min: ca. 5 min,
2. Testopropionat neben angeblichem Testopropionat (mit Benzylbenzoat), 1,5 ml/min, 1 cm/min,
3. Trenbolonacetat, Retentionszeit bei 1,5 ml/min und 1cm/min: ca. 3,3 min,
4. FB bei 1,5 ml/min und 1 cm/min,
5. Trenbolonenanthat, Retentionszeit bei 1,5 ml/min und 1 cm/min: ca. 14 min,
6. TT bei 2 ml/min und 1 cm/min,
7., 8. mittels der eingewogenen Wirkstoffmengen bestimmte Eichgeraden.
Verdankungen:
Den Herren Proff. P. Rüedi und M. D’Agostinis, Organisch-chemisches Institut der Universität Zürich-Irchel, sei für die Benützung ihrer Laboratorien, sowie für die Betreuung der Analyse ganz herzlich gedankt. Die Analysen wurden in der Zeit vom 25.-27.92006 durchgeführt.
*Weil mir zugetragen wurde, daß das Prinzip der Chromatographie nicht klar sei, erkläre ich diese grundlegende Labormethode in einem eigenen Thread.